Subscribe to the gold package and get unlimited access to Shamra Academy
Register a new userUsing of the PCR method for Identification of Leishmania tropica in Syria
ستخدام تقنية PCR للكشف عن الليشمانيا المدارية في سورية
1700
0 96
0
(
0
)
Created by
Shamra Editor
Ask ChatGPT about the research
ينتشر داء الليشمانيا في ثمانٍ و ثمانين دولة من دول العالم و منها الجمهوريـة العربيـة الـسورية، و يسبب هذا الداء طفيلي وحيد خلية من أنواع جنس الليشمانيا، و ينتمي لهذا الجنس نحو اثنين و عشرين نوعاً ممرضاً للإنسان. يعرف للداء ثلاثة أشكال سريرية هي الداء الجلدي و الداء الجلدي المخاطي و الداء الحشوي. و قد طُورت مجموعة من طرائق التشخيص و تحديد نوع الطفيلي بهدف إعطاء العلاج المناسب، يتضمن التحليل الايزوانزيمي و الطرائق المصلية المناعية و تقانات تهجين DNA و لعل من أهم الطرائـق الجزيئية المعتمدة حالياً في تشخيص هذا الداء و معرفة نوع الطفيلي المسبب و أدقها هي تقنيـة التفاعـل السلسلي للبوليميراز PCR التي تعتمد إما على DNA الجينومي أو DNA الكينيتوبلاستي. قمنا في هذا العمل باستفراد نمطي DNA في خطوة واحدة من عزلات مأخوذة من أفراد مـصابين بـداء الليـشمانيا الجلدية و مستنبتة في المختبر. و اِستُخدم DNA الكينيتوبلاستي لتحديد نوع الطفيلـي باسـتخدام تقنيـة PCR؛ و ذلك بوجود مرئسات نوعية تضخم شدفاً ذات أطوال مختلفة مميزة لنوع الطفيلي. و قد حدد فـي هذه الدراسة نوع الطفيلي المسبب لداء الليشمانيا الجلدية عند هـؤلاء المـصابين، و تبـين أن العـزلات المدروسة جميعها هي من نوع الليشمانيا المدارية tropica. L.
Leishmaniasis spreads in eighty-eight countries, including the Syrian Arab Republic. This disease is caused by a protozoic parasite of the genus Leishmania. Twenty-two species of leishmania were reported to be pathogenic for human. The disease is presented in three clinical forms: cutaneous, mucocutaneous and visceral leishmaniasis. A set of methods for diagnosis and identifying the type of parasite have been developed in order to give appropriate treatment. These methods include isoenzyme analysis, serological and immunological methods and DNA hybridization. The polymerase chain reaction (PCR), using genomic or kinetoplastid DNA; provides an excellent tool for diagnosis and characterization of leishmania species. In this work, the two types of DNA were extracted in one step from cultured isolates taken from patients. We have used kinetoplastid DNA and specific primers to determine parasite species by PCR. These primers amplify species specific fragment. In this study, we have determined that the causative species of the cutaneous leishmaniasis in all patients was L.tropica.
Artificial intelligence review:
Research summary
تناولت الدراسة استخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لتحديد نوع طفيلي الليشمانيا المسبب لداء الليشمانيات الجلدي في سوريا. الليشمانيا هي طفيليات أولية تسبب أمراضًا متعددة الأشكال السريرية، منها الجلدي، المخاطي الجلدي، والحشوي. تم استخراج نوعين من الحمض النووي (DNA) من عينات مأخوذة من مرضى مصابين، واستخدام الحمض النووي الكينيتوبلاستي ومجموعة من البادئات الخاصة لتحديد نوع الطفيلي. أظهرت النتائج أن النوع المسبب لداء الليشمانيات الجلدي في جميع المرضى هو L. tropica. هذه الدراسة تسلط الضوء على فعالية تقنية PCR في التشخيص الدقيق والسريع لأنواع الليشمانيا، مما يسهم في تقديم العلاج المناسب للمرضى.
Critical review
دراسة نقدية: تعتبر هذه الدراسة مهمة للغاية في مجال تشخيص داء الليشمانيات، حيث تقدم تقنية PCR كأداة فعالة ودقيقة لتحديد نوع الطفيلي. ومع ذلك، هناك بعض النقاط التي يمكن تحسينها. أولاً، كان من الأفضل تضمين عدد أكبر من العينات من مناطق مختلفة في سوريا للحصول على صورة أكثر شمولية. ثانيًا، لم يتم التطرق بشكل كافٍ إلى التحديات المحتملة في استخدام تقنية PCR في البيئات ذات الموارد المحدودة. وأخيرًا، كان من الممكن أن تكون الدراسة أكثر قوة إذا تم مقارنة نتائج PCR مع تقنيات تشخيصية أخرى مثل الفحص المجهري أو الاختبارات السيرولوجية.
Questions related to the research
-
ما هي الأنواع السريرية لداء الليشمانيات المذكورة في الدراسة؟
الأنواع السريرية لداء الليشمانيات المذكورة هي الجلدي، المخاطي الجلدي، والحشوي.
-
ما هي التقنية المستخدمة في الدراسة لتحديد نوع طفيلي الليشمانيا؟
التقنية المستخدمة هي تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).
-
ما هو النوع المسبب لداء الليشمانيات الجلدي في المرضى الذين شملتهم الدراسة؟
النوع المسبب هو L. tropica.
-
ما هي الفائدة الرئيسية لاستخدام تقنية PCR في تشخيص الليشمانيا؟
الفائدة الرئيسية هي التشخيص الدقيق والسريع لأنواع الليشمانيا، مما يسهم في تقديم العلاج المناسب.
References used
Alborzi, A., Pouladfar, G. R., Fakhar, M., Motazedian, M. H., Hatam, G. R. and Kadivar, M. R. (2008). Isolation of Leishmania tropica from a patient with visceral leishmaniasis and disseminated cutaneous leishmaniasis, southern Iran. Am J Trop Med Hyg 79, 435-7
Alexander, J., Satoskar, A. R. and Russell, D. G. (1999). Leishmania species: models of intracellular parasitism. J Cell Sci 112 Pt 18, 2993-3002
Aljeboori, T. I. and Evans, D. A. (1980a). Leishmania spp. in Iraq. Electrophoretic isoenzyme patterns. I. Visceral leishmaniasis. Trans R Soc Trop Med Hyg 74, 169-77
rate research
Read More
The parasitic antigens are of great interest in immune responses and in the
strategies for developing vaccines. The aim of this study was to identify the
major antigens which are expressed in the two leishmania tropica stages,
promastigote & amast
igote, employing the western blot analysis using the sera
collected from mice immunized with the above mentioned parasite stages' total
protein.
Kinetoplastid membrane protein-11 (KMP-11), a protein present in all kinetoplastid
protozoa studied up to date, is considered a potential vaccine candidate for Leishmaniasis.
Such vaccine molecules must be expressed in amastigotes which represent t
he infective
forms for mammals, while promastigotes are the flagellate forms found in the insect hosts.
However, the expression of KMP-11 in amastigotes is still a subject of controversy. In this
study, a strain of L. tropica was isolated, cultivated, and genotyped. The expression of
KMP-11 gene in this strain was evaluated in promastigotes and in amastigotes by RT-PCR
using specific primer pairs. The results proved the presence of mRNA of KMP-11 in both
promastigotes and amastigotes forms of L. tropica. The expression of this molecule in
amastigotes is consistent with the previously demonstrated immunoprotective capacity of
KMP-11 DNA vaccine as well as the presence of humoral and cellular immune responses
against KMP-11 in Leishmania-infected animals.
The aim of this work was determining the role of
Protein kinase C (PKC) signaling pathway in apoptosis of
Leishmania tropica promastigotes, through studying effects of PKC
specific inhibitor Staurosporine (STS) on the parasite. Our results
showed
that treated L. tropica with Staurosporine was
enough to inhibit PKC pathway completely, while viability test
showed that the concentration of STS to inhibit cell growth by 50%
(IC50 = 2.146μM).
A reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) technique was used
to detect infectious bronchitis virus (IBV) in the commercial broiler flocks in
Syria. 50 tissue samples were taken from tracheal tissue, trachea and kidney of
the broil
ers suspected of infectious bronchitis (IB) from different governorates
of Syria i.e. Latakia, Tartous, Hama and Damascus countryside. RNA was
extracted directly from the tissue samples and then RNA was converted to cDNA
by RT-PCR technology; PCR reaction and Nested PCR interaction were carried
out sequentially. The primers used in the RT-PCR reaction were selected from
the S1 gene (spike), where mutations of the virus genome were concentrated in
this region (the hypervariable region). Some positive samples (10) were injected
at an age of 9-11 days old SPFEE-specific pathogen free embryonated eggs
according to the methods adopted in virology. This research was carried out at
the laboratories of Latakia Research Center, General Commission for Scientific
Agricultural Research GCSAR, in cooperation with the PCR laboratory at the
Faculty of Veterinary Medicine in Hama. The results showed the existence of 37
positive case for RT-PCR (74%), and the infectious embryos showed clear and
characteristic anatomical lesions of the infectious bronchitis virus after 5-6 days
post injection, delayed and undeveloped fetal (dwarfism), fingertip entanglement
and hemorrhage compared with the negative control. The results also showed the
sensitivity and speed of the RT-PCR test in the detection of the IBV virus.
The leishmaniasis is a serious health problem in Syria, due to the
wide spreading of Leishmania tropica parasite , the difficulty of
controlling the reservoirs of parasites, and there is no specific ,safe
and active therapy .Due to lack of studies
of Leishmania tropica
genome , as initial step we detect the presence of SW3 gene.
Log in to be able to interact and post comments
comments
Fetching comments
Sign in to be able to follow your search criteria
