توصيف إنزيم galactosidase – β المنقى و المستخلص من دماغ الماعز حديثة الولادة

درست بعض خصائص إنزيم galactosidase-β المنقى و المستخلص من دمـاغ المـاعز حديثـة الولادة. و توصلت الدراسة إلى أن الإنزيم من نوع بروتين سكري، و تشكل مكونات الجزء الكربوهيـدراتي 1.22 % و ذلك بالاعتماد على طريقة فينول- حمض الكبريتيك. أما الدالة الحمضية (pH) المثلى لفعالية الإنزيم فقد كانت 5.5 و يفقد الإنزيم فعاليته كليا عند الدالـة الحمضية 5.8 ، و يظهر استقرارية عالية في المجال 4 - 6 من الدالة الحمضية. و أظهرت النتائج أن درجة الحرارة المثلى لفعالية الإنزيم °55C عند الدالة الحمـضية المثلـى. أمـا درجة الحرارة الملائمة لثبات الفعالية الإنزيمية فقد تراوحت بين °C 35 - 60 . و قد أظهر الإنزيم قدرة على حلمأة (Hydrolysis) (سكر اللاكتوز Lactose) بتركيز 5 % إذ تراوح مقدار الحلمهة بين 40 % بعد 60 دقيقة إلى 95 % بعد 270 دقيقة .

استخلاص و تنقية إنزيم galactosidase – β المستخلص من دماغ الماعز حديثة الولادة

عزل إنزيم galactosidase-β من دماغ الماعز حديثة الولادة باستخدام تسع طرائق، و قد وجد بأن طريقة 2.0 مول/ لتر من خلات الصوديوم + 2.0 مول/ لترمن كلوريد الصوديوم PH 5 هـي الطريقـة المثلى لاستخلاص الإنزيم و بأعلى فعالية نوعية له مقارنة ببقية الطرائق الأخرى التي استخدمت للغـرض نفسه. و رسب هذا الإنزيم باتباع أربع طرائق و قد تبين أن استخدام الأسيتون البارد هي الطريقة الفُضلى. و كان عدد مرات التنقية نحو 46.135 مرة و بلغت الحصيلة نحو 14.77 % عند استخدام الترشيح الهلامي 200-S Sephacryl) الخطوة الثانية). و بلغ الوزن الجزيئي للإنزيم 437.187 كيلو دالتون.

استخلاص و تنقية أنزيم الليبوكسيجينيز Lipoxygenase من بذور الفول السوداني .L hypogaea Arachis

تضمنت الدراسة اختيار أفضل طريقة لاستخلاص الأنزيم من بين تـسع طرائـق، ركـز المحتـوى البروتيني باستخدام الترسيب بالأسيتون البارد من بين خمس طرائق للتركيز (التنقية الجزئية). و أكملـت مراحل التنقية باستخدام التبادل الأيوني الهلامي بعمـود (50-A Sephadex – DEAE) ، و مـن ثـم استخدام الترشيح الهلامي بعمود السيفاكريل 300-S إذ بلغت الفعالية النوعيـة 9.1162 وحـدة/ ملغـم بروتين و الحصيلة الأنزيمية مقدارها 18.43 % و عدد مرات التنقية 61.8 مرة. ثم التأكد من نقاوة الأنزيم بإجراء عملية الترحيل الكهربائي بغياب المواد الماسخة لبروتين إذ ظهرت حزمة بروتينية واحدة في هلام متعدد اكريل أمايد.

توصيف أنزيم الليبوكسيجينيز Lipoxygenase المستخلص و المنقى من بذور الفول السوداني

وصف أنزيم الليبوكسيجينيز المستخلص من الفول السوداني بعد تنقيتـه فـي الدراسـة الـسابقة، و أشارت النتائج إلى أن الوزن الجزيئي للأنزيم هو 97 كيلو دالتن مقدراً بطريقة الترشيح الهلامي، و بلغت نقطة التعادل الكهربائي (PI) للأنزيم 2.6 ،كما أظهرت الدراسة أن الأنزيم من البروتينات الـسكرية و أن نسبة الجزء الكربوهيدراتي تشكل 13 % عند تقديرها بطريقة الفينول – حمض الكبريتيك.