اشترك بالحزمة الذهبية واحصل على وصول غير محدود شمرا أكاديميا
تسجيل مستخدم جديدإنتاج إنزيم B - غالاكتوزيداز B-galactosidase من بعض الأحياء الدقيقة
Production of B-galactosidase enzyme from some Microorganisms
1211
1 0
0.0
(
0
)
نشر من قبل
جامعة دمشق رسالة ماجستير
تاريخ النشر
2015
مجال البحث
الهندسة الزراعية
والبحث باللغة
العربية
تمت اﻹضافة من قبل
Shamra Editor
اسأل ChatGPT حول البحث
يعد إنزيم البتا - غالاكتوزيداز galactosidases (B-Ec 3.2.1.23) من أهم الإنزيما المستخدمة في الصناعات الغذائية وله العديد من التطبيقات الغذائية والتكنولوجية والبيئية الهامة في مجلات الحياة المختلفة . ويعتبر مثالاً هاماً لإنزيمات الحلمهة حيث يقوم البتا- غالاكتوزيداز بحلمهة اللاكتوز غالاكتوزيداز إلى ىسكريات أحادية وهي الغلوكوز والغلاكتوز .
B-D-Galactosidase (B-D- galactoside galactohydrolase , E. C. 3.2.1.23) , is one of the most important enzymes used in food processing . It a specific example of a glycosidase enzyme. Many organisms naturally synthesize B- galactosidase , including microorganisms , plants and animal cells . Among these possibilities , microbial sources are the best.
مراجعة الذكاء الصنعي:
ملخص البحث
تناولت هذه الرسالة العلمية إنتاج إنزيم بيتا-غالاكتوزيداز من بكتيريا الإشريكية القولونية (E.coli) باستخدام أوساط محددة التراكيز. يعتبر هذا الإنزيم من أهم الإنزيمات المستخدمة في الصناعات الغذائية والدوائية والبيئية. تم استخدام ثلاث سلالات بكتيرية مختلفة (DSM 498, DH5α, TOP10) وثلاثة أوساط محددة التراكيز (DMI, DMII, DMIII) لتحديد أفضل سلالة ووسط لإنتاج الإنزيم. أظهرت النتائج أن السلالة DSM 498 في الوسط DMII كانت الأفضل من حيث النمو وإنتاج الإنزيم. تم توسيع الإنتاج باستخدام تقنيتي التخمير بالدفعة والتخمير على دفعات، حيث أظهرت النتائج أن التخمير على دفعات أدى إلى إنتاجية أعلى للإنزيم مقارنة بالتخمير بالدفعة الواحدة. كما أظهرت التحليلات الإحصائية فروقًا معنوية في إنتاج الإنزيم بين الطريقتين. خلصت الدراسة إلى أهمية الاستمرار في الأبحاث لتحسين إنتاجية الإنزيم من خلال دراسة تأثير مكونات الوسط والعوامل الفيزيائية لعملية التخمير.
قراءة نقدية
دراسة نقدية: تعتبر هذه الدراسة خطوة مهمة نحو تحسين إنتاج إنزيم بيتا-غالاكتوزيداز باستخدام أوساط محددة التراكيز. ومع ذلك، كان من الممكن أن تكون الدراسة أكثر شمولية إذا تم تضمين تجارب إضافية لاختبار تأثير مكونات أخرى في الوسط مثل الفيتامينات والمعادن. كما أن الدراسة لم تتناول بالتفصيل التحديات التي قد تواجه تطبيق النتائج على نطاق صناعي واسع. بالإضافة إلى ذلك، كان من الممكن تحسين تحليل البيانات الإحصائية بتضمين مزيد من التفاصيل حول الفروق بين السلالات المختلفة. على الرغم من هذه النقاط، فإن الدراسة تقدم مساهمة قيمة في مجال إنتاج الإنزيمات الميكروبية وتفتح آفاقًا جديدة للبحث والتطوير في هذا المجال.
أسئلة حول البحث
-
ما هو الهدف الرئيسي من هذه الدراسة؟
الهدف الرئيسي من هذه الدراسة هو إنتاج إنزيم بيتا-غالاكتوزيداز باستخدام بكتيريا الإشريكية القولونية في أوساط محددة التراكيز وتحقيق إنتاجية أعلى للإنزيم مقارنة بالأوساط المعقدة التراكيز.
-
ما هي السلالة البكتيرية والوسط الأفضل لإنتاج إنزيم بيتا-غالاكتوزيداز؟
السلالة البكتيرية DSM 498 والوسط المحدد التراكيز الثاني DMII هما الأفضل لإنتاج إنزيم بيتا-غالاكتوزيداز.
-
ما هي التقنيات المستخدمة في التخمير في هذه الدراسة؟
تم استخدام تقنيتي التخمير بالدفعة (Batch Fermentation) والتخمير على دفعات (Fed Batch Fermentation) في هذه الدراسة.
-
ما هي النتائج الرئيسية التي توصلت إليها الدراسة بخصوص إنتاجية الإنزيم؟
توصلت الدراسة إلى أن التخمير على دفعات أدى إلى إنتاجية أعلى لإنزيم بيتا-غالاكتوزيداز مقارنة بالتخمير بالدفعة الواحدة، حيث كانت الإنتاجية أعلى بمعدل 5.7 مرة.
المراجع المستخدمة
ِAdam, A.c. Ruhio- Texeira , M. Polaina . J (2004) Lactose : the milk sugar from a biotechnological perspective
قيم البحث
اقرأ أيضاً
جمعت 40 عينة حليب من محافظة حمص لعزل البكتيريا المتبوغة و دراسة قدرتها
على إنتاج أنزيم β-galactosidase و تشخيص العزلة الأكثر كفاءة في إنتاج الأنزيم,
أظهرت النتائج وجود 25 عزلة منتجة لأنزيم β-galactosidase حيث قدرت فعالية
الβ-galactosidase باستخدام جهاز الطيفي الضوئي عند طول موجة420nm.
عزل إنزيم galactosidase-β من دماغ الماعز حديثة الولادة باستخدام تسع طرائق، و قد وجد بأن
طريقة 2.0 مول/ لتر من خلات الصوديوم + 2.0 مول/ لترمن كلوريد الصوديوم PH 5 هـي الطريقـة
المثلى لاستخلاص الإنزيم و بأعلى فعالية نوعية له مقارنة ببقية الطرائق الأخ
رى التي استخدمت للغـرض
نفسه. و رسب هذا الإنزيم باتباع أربع طرائق و قد تبين أن استخدام الأسيتون البارد هي الطريقة الفُضلى.
و كان عدد مرات التنقية نحو 46.135 مرة و بلغت الحصيلة نحو 14.77 % عند استخدام الترشيح الهلامي
200-S Sephacryl) الخطوة الثانية). و بلغ الوزن الجزيئي للإنزيم 437.187 كيلو دالتون.
درست بعض خصائص إنزيم galactosidase-β المنقى و المستخلص من دمـاغ المـاعز حديثـة
الولادة. و توصلت الدراسة إلى أن الإنزيم من نوع بروتين سكري، و تشكل مكونات الجزء الكربوهيـدراتي
1.22 % و ذلك بالاعتماد على طريقة فينول- حمض الكبريتيك.
أما الدالة الحمضية
(pH) المثلى لفعالية الإنزيم فقد كانت 5.5 و يفقد الإنزيم فعاليته كليا عند الدالـة
الحمضية 5.8 ، و يظهر استقرارية عالية في المجال 4 - 6 من الدالة الحمضية.
و أظهرت النتائج أن درجة الحرارة المثلى لفعالية الإنزيم °55C عند الدالة الحمـضية المثلـى. أمـا
درجة الحرارة الملائمة لثبات الفعالية الإنزيمية فقد تراوحت بين °C 35 - 60 .
و قد أظهر الإنزيم قدرة على حلمأة (Hydrolysis) (سكر اللاكتوز Lactose) بتركيز 5 % إذ تراوح
مقدار الحلمهة بين 40 % بعد 60 دقيقة إلى 95 % بعد 270 دقيقة .
زلت 40 عزلة من بكتريا Streptomyces من ترب محلية من مناطق مختلفة من سورية (دمشق–
السويداء– درعا- حمص– اللاذقية– الحسكة– ديـر الـزور) خـلال عـام 2012 .شخـصت العـزلات
مورفولوجياً و فيزيولوجيـاً تبعـاً للطرائـق المتبعـة فـي المـشروع الـدولي للستربتوميـ
سيس ISP
(Project Streptomyces International), أثبت التـشخيص أن العـزلات تنتمـي إلـى تـسعة
و عشرين نوعا مختلفا من Streptomyces .غربلت العزلات لتقييم مقدرتها على إنتاج إنـزيم غلوكـوز
إيزوميراز باستخدام أوساط انتقائية صلبة بالاعتماد على كثافة النمو كمؤشر على استهلاك سكر الزيلـوز
كمصدر للكربون و من ثم أوساط سائلة لاختبار الفعالية الإنزيميـة. اسـتخلص الإنـزيم باسـتخدام الــ
CTAB بتركيز %1.0 ،من ثم قُدرت فعاليته باستعمال الغلوكوز كمادة أساسية (ركيزة) و قـيس النـاتج
بطريقة لونية باستخدام المطياف الضوئي عند طول موجة 560 نانومتر، و كان أفضل إنتاج للإنزيم مـن
قبل العزلة SH10) roseiscleroticus. S) حيث بلغت الفعالية الإنزيمية 9.4 وحدة/مل.
اختُبر التأثير الحيوي لبعض مستخلصات أوراق نبات الآس الشائع السوري communis Myrtus
.L في نمو بعض الأحياء الدقيقة الممرضة المعزولة من مختبر مستشفى الأسد الجامعي فـي اللاذقيـة بطريقة الانتشار بواسطة الأقراص. أظهرت النتائج أن المستخلصات المائية الباردة
والساخنة للأوراق تمتلك فعالية مـضادة إزاء جميـع البكتيريا السلبية والإيجابية غرام والفطريات الممرضة albicans Candida باستثناء بكتيريا
لكليبسيلة .Klebsiella pneumoniae الرئوية وتمتلك المستخلصات العضوية لأوراق نبات الآس الشائع فعاليـة مـضادة إزاء بكتيريـا المتقلبـات الشائعة vulgaris Proteus والمكورات المعويـة البرازيـة faecium Entrococcus والمكـورات العنقودية الذهبية aureus Staphylococcus والبيضاء albus Staphylococcus ،وكانت بكتيريـا
الزوائــف aeruginosa Pseudomonas و fluorescens Pseudomonas حــساسة لمعظــم المستخلصات العضوية، والتأثير الحيوي الأكثر فعالية في الأحياء الدقيقـة الممرضـة المعزولـة كـان لمستخلص الميتانول، حيث أقطار حلقات تثبيط النمو الميكروبي كانت أكبر بتأثير المستخلصات من أقطار حلقات التثبيط بالمضادات الحيوية الشاهدة.
وكانت بكتيريا marcescens Serratia وcalcoaceticus Acinetobacter حساسة لمستخلصات الميتانول (بقطر تثبيط 33.37 و33.27 ملم على التوالي) والإيتانول والأستون وإيتيل أسـيتات ولكنهـا كانت مقاومة للمستخلصات الأخرى، وكانت بكتيريـا الكليبـسيلة الرئويـة pneumoniae Klebsiella حساسة لمستخلص الإيتانول فقط بقطر 33.20 ملم.
تشير نتائج دراسة الفاعلية الحيوية باستخدام المذيبات المختلفة أن لمستخلصات أوراق نبـات الآس الشائع السوري تأثيراً مضاداً إزاء بعض الأحياء الدقيقة البكتيرية والفطريات الممرضة المختبرة، وبـذلك يمكن أن تكون مصدراً للمضادات الحيوية الطبيعية إزاء البكتيريا والفطريات الممرضة في المستقبل.
الأسئلة المقترحة
سجل دخول لتتمكن من نشر تعليقات
التعليقات
جاري جلب التعليقات
سجل دخول لتتمكن من متابعة معايير البحث التي قمت باختيارها
