ترغب بنشر مسار تعليمي؟ اضغط هنا

تأثير عامل الحرارة في الكشف عن فيروس التهاب المفاصل و الدماغ الماعزي CAEV باستخدام تقنية RT-QPCR

The Effect of Temperature Factor on the Detection of virus Caprine Arthritis- Encephalitis Virus (CAEV), using the technique of Real Time-PCR

1035   0   38   0 ( 0 )
 تاريخ النشر 2014
والبحث باللغة العربية
 تمت اﻹضافة من قبل Shamra Editor




اسأل ChatGPT حول البحث

تشكل هذه الدراسة مرحلة من مراحل تطويع تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي للكشف عن وجود فيروس التهاب المفاصل و الدماغ الماعزي Caprine Arthritis-Encephalitis Virus (CAEV في العينات الإكلينيكية في الحدود الدنيا الممكنة ضمن عينات السائل الطافي للمزارع الخلوية المصابة بالفيروس, و التي تعتمد على تحديد الجرعة الممرضة 50% لظهور الأضرار الخلوية المرضية على خلايا الزراعة الخلوية, و تحديد الحدود الدنيا لعدد الوحدات الحموية.


ملخص البحث
تتناول هذه الدراسة تأثير عامل الحرارة على الكشف عن فيروس التهاب المفاصل والدماغ الماعزي (CAEV) باستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (RT-QPCR). تهدف الدراسة إلى تحديد الجرعة الممرضة الأدنى للفيروس وتقييم كفاءة زوجين من المشرعات (gag و env) في الكشف عن الفيروس في السوائل البيولوجية. أظهرت النتائج أن المشرعة (gag) كانت أكثر فعالية ودقة من المشرعة (env) في الكشف عن الفيروس، وأن درجة الحرارة المثلى لعمل الإنزيمات هي 37 درجة مئوية. تم استخدام خلايا الظهارة المفصلية للماعز ووسط الزراعة الخلوية لإجراء التجارب، وتم تحضير العينات وزراعتها في ظروف مختبرية محكمة. أظهرت النتائج أن تقنية RT-QPCR تعطي نتائج أدق مقارنة بتقنية PCR الكلاسيكية، ولكن هناك حاجة لمزيد من البحث لتطوير تقنيات أكثر دقة للكشف عن الفيروس في الظروف الحقلية.
قراءة نقدية
تعد هذه الدراسة خطوة مهمة نحو تحسين تقنيات الكشف عن فيروس التهاب المفاصل والدماغ الماعزي، إلا أنها تفتقر إلى مناقشة بعض الجوانب الهامة. على سبيل المثال، لم تتناول الدراسة بشكل كافٍ التحديات التي قد تواجه تطبيق هذه التقنية في الظروف الحقلية، مثل التغيرات والطفرات الوراثية التي قد تطرأ على الفيروس. كما أن الدراسة لم تقدم حلولاً واضحة للتغلب على هذه التحديات. بالإضافة إلى ذلك، كان من الممكن أن تكون الدراسة أكثر شمولية إذا تضمنت مقارنة مع تقنيات أخرى للكشف عن الفيروس، مما قد يساعد في تحديد أفضل الطرق المتاحة. على الرغم من ذلك، فإن النتائج التي توصلت إليها الدراسة تعد إضافة قيمة إلى المعرفة الحالية حول الكشف عن فيروس CAEV.
أسئلة حول البحث
  1. ما هي التقنية المستخدمة في هذه الدراسة للكشف عن فيروس التهاب المفاصل والدماغ الماعزي؟

    تم استخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (RT-QPCR) للكشف عن فيروس التهاب المفاصل والدماغ الماعزي (CAEV).

  2. ما هي درجة الحرارة المثلى لعمل الإنزيمات في الكشف عن فيروس CAEV؟

    درجة الحرارة المثلى لعمل الإنزيمات في الكشف عن فيروس CAEV هي 37 درجة مئوية.

  3. أي من المشرعات كانت أكثر فعالية في الكشف عن فيروس CAEV، gag أم env؟

    المشرعة (gag) كانت أكثر فعالية ودقة من المشرعة (env) في الكشف عن فيروس CAEV.

  4. ما هي التحديات التي لم تتناولها الدراسة بشكل كافٍ؟

    لم تتناول الدراسة بشكل كافٍ التحديات التي قد تواجه تطبيق تقنية RT-QPCR في الظروف الحقلية، مثل التغيرات والطفرات الوراثية التي قد تطرأ على الفيروس.


المراجع المستخدمة
Fieni F., Pellerin J.L., Roux C., Poulin N., Baril G., Fatet A., Valasg S., Chatagnon G., Mermillod P., Guignot F. (2012) Can caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) be transmitted by in vitro fertilization with experimentally infected sperm? Theriogenology 77. 644–651
Cheevers WP, Knowles DP, McGuire TC, Cunningham DR, Adams DS, Gorham JR. Chronic disease in goats orally infected with two isolates of the caprine arthritis-encephalitis lentivirus. Lab Invest 1988;58:510–7
Chebloune Y, Sheffer D, Karr BM, Stephens E, Narayan O. Restrictive type of replication of Ovine/caprine lentiviruses in ovine fibroblast cell cultures. Virology 1996;222:21–30
قيم البحث

اقرأ أيضاً

استُخدمت تقانة تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR للكشف عن فيروس التهاب القصبات المعدي IBV) infectious bronchitis virus) في قطعان الفروج التجارية في سورية، حيث جمعت 50 عينة مرضية مشتبهة من أنسجة الرغامى في القصبة الهوائية، والكلى، من 50 قطيع من دجاج اللحم (الفروج) المشتبه بإصابتها بمرض التهاب القصبات المعدي infectious bronchitis (IB)، والموزّعة في مناطق مختلفة من سورية (اللاذقية، وطرطوس، وحماه، وريف دمشق). حيث تم استخلاص الحمض النووي الفيروسي RNA من أنسجة العينات المرضية مباشرة، ومن ثم تحويل RNA إلى cDNA بتقنية النسخ العكسي RT-PCR، واخضاعها لاختبار تفاعل PCR، وتفاعل Nested PCR. اختيرت البادئات المستخدمة في تفاعل RT-PCR من تحت وحدة S1 للمورثة S) spike) التي تتركز فيها الطفرات التي تصيب مورثة الفيروس في هذه المنطقة (منطقة شديدة التباين)، كما تم تمرير 10 من العينات الإيجابية المحتوية على الفيروس بأجنة الدجاج النامية الخالية من العوامل الممرضة، Specific pathogen free embryonated egg ((SPF بعمر 9-11 يوم تحضين وحسب الطرق المعتمدة في علم الفيروسات. نُفذ البحث في مخابر الهيئة العامة للبحوث العلمية الزراعية (مركز بحوث اللاذقية) بالتعاون مع مخبر PCR في كلية الطب البيطري بحماه. بيّنت نتائج اختبار RT-PCR، وجود 37 حالة إيجابية للاختبار وبنسبة 74% من عينات المزارع المختبرة، وأظهرت نتائج الحقن في أجنة الدجاج النامية آفات تشريحية واضحة ومميزة لفيروس التهاب القصبات المعدي بعد 5- 6 أيام من الحقن، وتأخر وعدم تطور ونمو الجنين (تقزم)، وتشابك أصابع ونزف دموي، بالمقارنة مع الشاهد السلبي، وأظهرت النتائج أيضاً حساسية تقنية RT-PCR للكشف عن فيروس IBV.
يتضمن هذا البحث نمذجة و محاكاة لمرسل و مستقبل نظام العبور المتعدد بتقسيم الكود OCDMA (Optical Code Division Multiple Access) ذو ترميز المطال الطيفي SAC (Spectral Amplitude Coding) حيث تمت دراسة تأثير نوع مولد النبضات المستخدم في مرسل SAC-OCDMA ذي تقن ية الكشف المباشر و تأثير طول الليف البصري على عامل جودة الإشارة Q و على نسبة خطأ البت BER، كما تم إجراء مقارنة بين نظام SAC-OCDMA ذو تقنية الكشف المباشر و آخر ذو تقنية الطرح التكميلي من حيث عامل جودة الإشارة Q و نسبة خطأ البت BER عند استخدام نفس البارامترات للنظامين.
تم إجراء البحث على جرذان ويستر أحدث لديها المرض بواسطة حقن 0.1 مل من العامل المساعد التام في أخمص القدم اليمنى و في اليوم 14 من إحداث المرض أعطي الروزوفاستاتين بجرعتين 5 ملغ\كغ باليوم و 20 ملغ\كغ باليوم فمويا و ديكسا ميتازون 0.05 ملغ\كغ في اليوم حقنا عضليا و في اليوم 28 تم إجراء الدراسة النسيجية على المفاصل المدروسة.
هدف البحث لدراسة تأثير استخدام ثلاثة أنواع من البكتريا المحفزة لنمو النبات (PGPR) A zotobacter chroococcum و Bacillus megaterium و Frateuria aurantia بثلاث طرائق تلقيح (بذور, شتول, بذور و شتول) في الحد من الاصابة بفيروس موزاييك الخيار على نباتات البندورة المزروعة ضمن أصص. استخدمت بعد 60 يوماً من العدوى الفيروسية بعضاً من معايير النمو مثل ارتفاع النبات و عدد الأوراق و الوزن الطازج للمجموع الخضري و المجموع الجذري. نفذ البحث في موسم 2016 ضمن نفق بلاستيكي في محافظة طرطوس.
أجري مسح حقلي للتحري عن فيروس شحوب وتقزم الحمص في حقول الفول في بعض مناطق زراعتها في محافظة اللاذقية. جمعت خلال الجولات الحقلية 252 عينة من نباتات عليها أعراض شحوب وتقزم من 54 حقلاً. أظهرت نتائج اختبار بصمة النسيج المناعي (TBIA) وجود فيروس شحوب وتقزم الحمص على نباتات الفول في بعض مناطق زراعتها وقد تباينت نسب الإصابة بالفيروس في العينات المختبرة من الحقول فكانت أعلى نسبة 33.33 % في قرية رأس العين ، وأقلها في قرية البرجان 7.69 %
التعليقات
جاري جلب التعليقات جاري جلب التعليقات
سجل دخول لتتمكن من متابعة معايير البحث التي قمت باختيارها
mircosoft-partner

هل ترغب بارسال اشعارات عن اخر التحديثات في شمرا-اكاديميا