استخلاص و تنقية أنزيم الليبوكسيجينيز Lipoxygenase من بذور الفول السوداني .L hypogaea Arachis

تضمنت الدراسة اختيار أفضل طريقة لاستخلاص الأنزيم من بين تـسع طرائـق، ركـز المحتـوى البروتيني باستخدام الترسيب بالأسيتون البارد من بين خمس طرائق للتركيز (التنقية الجزئية). و أكملـت مراحل التنقية باستخدام التبادل الأيوني الهلامي بعمـود (50-A Sephadex– DEAE) ، و مـن ثـم استخدام الترشيح الهلامي بعمود السيفاكريل 300-S إذ بلغت الفعالية النوعيـة 9.1162 وحـدة/ ملغـم بروتين و الحصيلة الأنزيمية مقدارها 18.43 % و عدد مرات التنقية 61.8 مرة. ثم التأكد من نقاوة الأنزيم بإجراء عملية الترحيل الكهربائي بغياب المواد الماسخة لبروتين إذ ظهرت حزمة بروتينية واحدة في هلام متعدد اكريل أمايد.

توصيف أنزيم الليبوكسيجينيز Lipoxygenase المستخلص و المنقى من بذور الفول السوداني

وصف أنزيم الليبوكسيجينيز المستخلص من الفول السوداني بعد تنقيتـه فـي الدراسـة الـسابقة، و أشارت النتائج إلى أن الوزن الجزيئي للأنزيم هو 97 كيلو دالتن مقدراً بطريقة الترشيح الهلامي، و بلغت نقطة التعادل الكهربائي (PI) للأنزيم 2.6 ،كما أظهرت الدراسة أنالأنزيم من البروتينات الـسكرية و أن نسبة الجزء الكربوهيدراتي تشكل 13 % عند تقديرها بطريقة الفينول – حمض الكبريتيك.