ستخدام تقنية PCR للكشف عن الليشمانيا المدارية في سورية

ينتشر داء الليشمانيا في ثمانٍ و ثمانين دولة من دول العالم و منها الجمهوريـة العربيـة الـسورية، و يسبب هذا الداء طفيلي وحيد خلية من أنواع جنس الليشمانيا، و ينتمي لهذا الجنس نحو اثنين و عشرين نوعاً ممرضاً للإنسان. يعرف للداء ثلاثة أشكال سريرية هي الداء الجلدي و الداء الجلدي المخاطي و الداء الحشوي. و قد طُورت مجموعة من طرائق التشخيص و تحديد نوع الطفيلي بهدف إعطاء العلاج المناسب، يتضمن التحليل الايزوانزيمي و الطرائق المصلية المناعية و تقانات تهجين DNA و لعل من أهم الطرائـق الجزيئية المعتمدة حالياً في تشخيص هذا الداء و معرفة نوع الطفيلي المسبب و أدقها هي تقنيـة التفاعـل السلسلي للبوليميراز PCR التي تعتمد إما على DNA الجينومي أو DNA الكينيتوبلاستي. قمنا في هذا العمل باستفراد نمطي DNA في خطوة واحدة من عزلات مأخوذة من أفراد مـصابين بـداء الليـشمانيا الجلدية و مستنبتة في المختبر. و اِستُخدم DNA الكينيتوبلاستي لتحديد نوع الطفيلـي باسـتخدام تقنيـة PCR؛ و ذلك بوجود مرئسات نوعية تضخم شدفاً ذات أطوال مختلفة مميزة لنوع الطفيلي. و قد حدد فـي هذه الدراسة نوع الطفيلي المسبب لداء الليشمانيا الجلدية عند هـؤلاء المـصابين، و تبـين أن العـزلات المدروسة جميعها هي من نوع الليشمانيا المدارية tropica. L.

Leishmaniasis spreads in eighty-eight countries, including the Syrian Arab Republic. This disease is caused by a protozoic parasite of the genus Leishmania. Twenty-two species of leishmania were reported to be pathogenic for human. The disease is presented in three clinical forms: cutaneous, mucocutaneous and visceral leishmaniasis. A set of methods for diagnosis and identifying the type of parasite have been developed in order to give appropriate treatment. These methods include isoenzyme analysis, serological and immunological methods and DNA hybridization. The polymerase chain reaction (PCR), using genomic or kinetoplastid DNA; provides an excellent tool for diagnosis and characterization of leishmania species. In this work, the two types of DNA were extracted in one step from cultured isolates taken from patients. We have used kinetoplastid DNA and specific primers to determine parasite species by PCR. These primers amplify species specific fragment. In this study, we have determined that the causative species of the cutaneous leishmaniasis in all patients was L.tropica.