ترغب بنشر مسار تعليمي؟ اضغط هنا

عزل مورثة ال AapJ و تنسيلها من بكتريا البروسيلا الضأنية

Isolation And Cloning Of AapJ Gene From Brucella melitensis

1451   0   56   0 ( 0 )
 تاريخ النشر 2013
  مجال البحث علم الأحياء
والبحث باللغة العربية
 تمت اﻹضافة من قبل Shamra Editor




اسأل ChatGPT حول البحث

تعد البروسيلا بكتيريا ممرضة مشتركة بين الإنسان و الحيوانات الأهلية، و قد تزايدت الخسائر الاقتصادية الناجمة عن تأثير البروسيلا في الثروة الحيوانية التي تنعكس بدورها على الإنسان، و هي بذلك تمثل ضرراً للصحة و الاقتصاد في سورية. و قد تركزت الجهود للوقاية من الإصابة بداء البروسيلا من خلال اللجوء إلى استخدام لقاحات محضرة من سلالات البروسيلا، يجري العمل حالياً لتحضير بروتينات مؤشبة يمكن استخدامها لقاحاً أو محسناً للقاح تقليدي، و ذلك من خلال دراسة المورثات المرمزة للبروتينات المسؤولة عن الفوعة عند البروسيلا عن طريق تنسيلها.


ملخص البحث
تتناول هذه الدراسة عزل وتنسيل مورثة aapJ من بكتيريا البروسيلا الضأنية، وهي بكتيريا تسبب داء البروسيلات الذي يصيب الإنسان والحيوان. يهدف البحث إلى تحضير بروتينات مؤشبة يمكن استخدامها كلقاح أو كمحسن للقاح التقليدي. تم عزل المورثة وتضخيمها باستخدام تقنية تفاعل السلسلة البوليميراز (PCR) باستخدام DNA الجينومي للبروسيلا الضأنية. بعد ذلك، تم إدخال المورثة في بلاسميد التعبير المورثي pET-15b ومن ثم إدخال البلاسميد المؤشب إلى بكتيريا Escherichia coli DH10B بهدف تنسيل المورثة. تم التأكد من نجاح عملية التنسيل من خلال تحليل تسلسل المورثة ومقارنتها بالتسلسل الموجود في قاعدة بيانات NCBI، حيث تبين أن المورثة خالية من أي طفرة. كما أظهرت المقارنة مع جينومات بكتيريا أخرى تشابهاً بنسبة 90% مع Ochrobactrum anthropic و77% مع Mesorhizobium loti. تهدف الدراسة في مراحلها اللاحقة إلى إنتاج بروتين AapJ والتحري عن استمناعيته لاستخدامه كلقاح فعال ضد البروسيلا.
قراءة نقدية
دراسة نقدية: تعتبر هذه الدراسة خطوة هامة في مجال البحث عن لقاحات جديدة ضد داء البروسيلات، حيث تم التركيز على عزل وتنسيل مورثة aapJ من بكتيريا البروسيلا الضأنية. ومع ذلك، يمكن أن تكون هناك بعض النقاط التي تحتاج إلى مزيد من التوضيح أو التحسين. على سبيل المثال، لم يتم التطرق بشكل كافٍ إلى الآثار الجانبية المحتملة لاستخدام البروتين المؤشب كلقاح. كما أن الدراسة لم تتناول بالتفصيل كيفية تقييم فعالية اللقاح في النماذج الحيوانية أو البشرية. بالإضافة إلى ذلك، قد يكون من المفيد تقديم معلومات أكثر عن التحديات التي واجهت الباحثين خلال عملية التنسيل وكيفية التغلب عليها. بشكل عام، تعتبر الدراسة إضافة قيمة إلى الأدبيات العلمية، ولكنها تحتاج إلى مزيد من البحث والتطوير لتكون قابلة للتطبيق العملي.
أسئلة حول البحث
  1. ما هو الهدف الرئيسي من هذه الدراسة؟

    الهدف الرئيسي هو عزل وتنسيل مورثة aapJ من بكتيريا البروسيلا الضأنية لتحضير بروتينات مؤشبة يمكن استخدامها كلقاح أو كمحسن للقاح التقليدي.

  2. ما هي التقنية المستخدمة لتضخيم المورثة في الدراسة؟

    تم استخدام تقنية تفاعل السلسلة البوليميراز (PCR) لتضخيم المورثة.

  3. كيف تم التأكد من نجاح عملية التنسيل؟

    تم التأكد من نجاح عملية التنسيل من خلال تحليل تسلسل المورثة ومقارنتها بالتسلسل الموجود في قاعدة بيانات NCBI.

  4. ما هي نسبة التشابه بين مورثة aapJ في البروسيلا الضأنية وجينومات بكتيريا أخرى؟

    أظهرت المقارنة تشابهاً بنسبة 90% مع Ochrobactrum anthropic و77% مع Mesorhizobium loti.


المراجع المستخدمة
Al-Mariri, A, 2010. Protection of BALB/c mice against Brucella melitensis 16M infection induced by vaccination with live Escherchia coli expression Brucella P39 protein. Vaccine 28
Ana p. Teixeira-Gomes, Axel Cloeckaert, and ichel S. Zygmunt, 2000. Characterization of Heat, Oxidative, and Acid Stress Responses in Brucella melitensis. Laboratoire de Pathologie Infectieuseet Immunologie, Institut National de la Recherche
Delrue, R. M., Lestrate, P., Tibor, A., Letesson, J. J and De Bolle X, 2004. Brucella pathogenesis genes identified from random large-scale screens FEMS microbiology letters
قيم البحث

اقرأ أيضاً

جمعت 15 عينة من ترب ملوثة بالزيت لعزل بكتريا aeruginosa Pseudomonas و تشخيصها في مقـدرتها مدى لمعرفة Brain Heart Brothو Tributrin Agar ،Cetermide Agar من بيئات على إنتاج إنزيم الليباز خلال عامي 2007-2008 م. أظهرت النتائج نمو المستعمرات باللون الأخض ر أو الأخضر المصفر و المحاطة بهالات شفافة متباينة القطر في ثلاث عينات فقط، و قـد تأكـد تنميطهـا فـي مستشفى المواساة على أنها تابعة لنوع aeruginosa Pseudomonas ،كما بينت النتائج أن الـشروط المثلى لإنتاج إنزيم الليباز كانت بدرجة حرارة 35 م º و بدرجة حموضة pH = 8 ، و المدة الزمنية اللازمة لإنتاج الأنزيم بفعالية عالية (3.63%) في الأوساط السائلة المغمورة كانت في مدة زمنية مـن الحـضن قدرت بثلاثة أيام ضمن الشروط المثلى، مما يوضح أهمية هذه العزلات في إنتاج إنزيم الليبـاز و إمكانيـة التحكم بظروف تنميتها و إنتاجها لأغراض صناعية.
جمعت عينات من جذور نبات الخس و الجزر و الأجسام الحجريـة للفطـر الممـرض Sclerotinia sclerotiorum و التربة من المنطقة الجنوبية من دمشق (الطيبة، الدرخبية، زاكية، المقيلبة) خلال العـام 2001 ، و عزلت 82 عزلة بكتيرية، منها 48 عزلة من الجذور، و 27 من سطح الأجسام الحجرية، و 7 من التربة المحيطة بالجذور. ثم اختبرت صفة التضاد لهذه العزلات البكتيرية اتجاه المسبب الممرض للعفـن الأبيض في المختبر vitro In . حيث وجد أن 7 عزلات بكتيرية كان لها تأثير مـضاد فـي نمـو الفطـر الممرض و تراوحت مسافة التضاد ما بين 3.1-11 ملم، و قد حققت العزلة 4.K82 المعزولة مـن التربـة المحيطة بالجذور أكبر مسافة تضاد بين نموها و نمو الفطر الممرض 11 ملم. و أمكن تعريف ثلاث عزلات بكتيرية منها و هي: 4.K82 المعزولة من تربة الخس، و FN3 المعزولة من سطح الأجسام الحجرية مـن حقول الخس، و 4.K4 المعزولة من جذور نبات الجزر، و هي تنتمي إلى جنس .spp Bacillus .
يعد داء البروسيلات مرضاً مستوطناً في سورية، و مشتركاً بين الإنسان و الحيوان، يـصيب أعـداداً كبيرةً من الحيوانات، مما يؤدي إلى تزايد عدد الحالات بين البشر، البروسيلا بكتيريا داخل خلوية قـادرة على إصابة كلٍ من الإنسان و الحيوان. الهدف من هذه الدراسة هو تطوير بروتوكول التفاعل السلسلي للبوليميراز (PCR) للتحـري عـن البروسيلا الضأنية melitensis Brucella في الجبنة الملوثة صنعياً.
أجري البحث على 450 عينة ( 150 عينة لحم صدر – 150 عينة لحم فخد – 150 عينة لحم جناح ) جمعت من محلات بيع لحم الدجاج المنتشرة في مدينة حماة للكشف عن تلوثها بالعنقوديات.
تُعد بكتيريا sakazakii Enterobacter من العوامل الممرضة الانتهازية المسببة لإصابات مميتـة عند الأطفال و كبار السن و البالغين منقوصي المناعة، و هي بكتيريا عصوية الشكل سالبة الغرام لا هوائية اختيارية تنتمي إلى فصيلة Enterobacteriaceae و جنس Enterobact er .و مع أن الموطن الطبيعي لهذه البكتيريا غير محدد بدقة إلا أن وجودها بنسبة كبيرة في التوابل و الأعشاب قد يشير إلى أن النباتات تمثل الخازن الطبيعي لها.
التعليقات
جاري جلب التعليقات جاري جلب التعليقات
سجل دخول لتتمكن من متابعة معايير البحث التي قمت باختيارها
mircosoft-partner

هل ترغب بارسال اشعارات عن اخر التحديثات في شمرا-اكاديميا