هدفَ هذا البحث إلى اختبار بروتوكولاتٍ لعزل خلايا جذعية متوسطة (MSCs) من أنسجة
الحبل السري لمواليد سوريين، و تكثيرها في أوساط استنبات ملائمة، و تنميطها، و تحريض تمايزها.
عزلت خلايا جذعية متوسطة من عينتي حبلٍ سري لولادتين قيصريتين اعتماداً على خاصية التصاق
هذه الخلايا بالسطوح، و استنبتت الخلايا المعزولة في وسط مغذٍ خاص يسمح بنموها و تكاثرها. نُمطت
الخلايا بتقنية الجريان الخلوي باستخدام أضداد وحيدة النّسيلة مفلورة موجهةٍ لواسمات سطحية نوعية
بالخلايا الجذعية المتوسطة. جرى إمرار جزء من هذه الخلايا عدة مرات في وسط الاستنبات، و حفِظَ
الجزء الآخر في الآزوت السائل، و قيمت عيوشية الخلايا بعد التجميد. جرى استقصاء قدرة هذه الخلايا
على التمايز إلى خلايا شحمية في وسط استنبات يحتوي الإندوميتاسين و الهيدروكورتيزون.
This research aims at establishing
and testing protocols for isolation, in vitro proliferation, phenotyping, and
differentiation of MSCs embedded in umbilical cord tissues of Syrian
newborns.
MSCs were isolated from two caesarian births depending on their
adherence characteristic on plastic surfaces, and cells were cultured in MSC
medium for their growth and proliferation. Cell phenotyping was performed by
flow cytometry using fluorescent monoclonal antibodies specific to MSCs’
surface markers. Cultured cells were passed several times and a portion of
these cells was cryopreserved in liquid nitrogen, and cell viability was assessed.
Differentiation of these MSCs into adipocytes was conducted using culture
medium Indomethacin and hydrocortisone.
المراجع المستخدمة
Cognet, P.A., and Minguell J. J., 1999. Phenotypical and functional properties of human bone marrow mesenchymal progenitor cells. J. Cell Physiol; V.181, pp. 67-73
Meirelles, L.D.S., Caplan, A.I., and Nardi, N., 2008. In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells. Stem Cells; V.26, pp. 2287–2299
Haniffa, M.A., Collin, M.P., Buckley, C.D., and Dazzi, F., 2009. Mesenchymal stem cells: the fibroblasts’ new clothes? Haematologica; V.94, pp. 258-263