جربت جرعات متزايدة من مادة الميثوتركسات, بحقنة عضلية واحدة على الفأر من سلالة Swiss ، و قدرت الفاعلية التكاثرية بتعداد عام للنطاف و حركيتهـا فـي كامـل الخصية اليسرى و بربخها بعد (15) يوماً من الحقن. كما أخذت أوزان الخصى و بربخها للحيـوانات فـي الجرعات المختلفة. تشير النتائج إلى أن الميثوتركسات المعاكس لحمض الفوليك يؤثر سلبياً في إنتاج النطاف و بـصورة متناسبة مع الجرعة. كما تبين أن الجرعات العالية (kg / mg 200) تؤدي إلى حالة مـن قلـة النطـاف oligospermia. و يقدر أن الميثوتركسات قد أدت إلى تثبيط الفاعلية التكاثرية للخلايا المكونة للنطاف و إلى نوع مـن السمية الخلوية cytotoxicity في الجرعات العالية. و يتطلب فهم ذلك دراسات أخرى.