أدى حقن جرعات متزايدة من الميتوتركسات (25 ،50 ،100 ،150 ،200 ،250 ،300 ملـغ/كـغ) عضلياً في ذكور الفئران من السلالة strain Swiss إلى تناقص مضطرد في عدد خلايا السلالة المنويـة في المرحلة VII من موجة تشكل النطاف ، و ذلك عند الجرعات المنخفضة من هذه المادة، و إلى تـأثير مميت عند الجرعات العالية. كانت الجرعات 25 و 50 ملغ/كغ محتملة من قبل الفئران، و لكن السمية الدوائية للعقـار المـستخدم كانت مرتفعة عند الجرعات 100 و 150 ملغ/كغ. و قد لوحظ أثر السمية الخلوية الحاد عند الجرعة 200 ملغ/كغ و نجم عنه تخريب واضح في المكونات الخلوية لجدران الأنابيب المنوية. بينما كان تأثير الجرعات العالية (250 و 300 ملغ/كغ) مميتاً إذ أدى الحقن بهذه الجرعات إلى نفوق جميع الحيوانات بعد أسبوع من الحقن. يبدو من النتائج أن لعقار الميتوتركسات تأثيراً سمياً واضحاً في السلالة المنوية، و ذلـك بـدءاً مـن الجرعة 100 ملغ/كغ، إذ بدأ إنتاج النطاف ينخفض، و كان كبيراً عند الجرعة 200 ملغ/كغ، في حـين أن الجرعات العالية قد سببت تخريباً مميتاً في خلايا السلالة المنوية و نفوق الفئران بعد أسبوع من الحقن.