تحديد الحموض الأمينية (سيرين و غلايسين) بالتحليل الكروماتوغرافي السائل عالي الأداء المزود بكاشف الفلورة عن طريق تشكيل مشتقات ايزندولية

درسنا العوامل المؤثرة في تفاعل الاشتقاق لسيرين (Ser) و غلايسين (Gly) بمزيج من كاشفي الاشتقاق أورتوفتال ألدهيد (OPA) و 3 مركبتو بروبيونيك أسيد (3-MPA) لتشكيل مشتقات ايزندولية،حددنا الزمن اللازم و الأمثل لتفاعل الاشتقاق و هو خمس دقائق، يتم التفاعل في وسط من واقي البورات (pH=10,0.4M)، بنسبة ارتباط 3-MPA:OPA توافق 1:3 و نسبة ارتباط OPA:Amino acid توافق 1:2،حددنا الزمن الأمثل لقياس المركب المشتق من 0.1-20 min. و بعد دراسة كافة هذه العوامل قمنا بتحديد المشتق الايزندولي للسيرين و المشتق الإيزندولي للغلايسين بالتحليل بالكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء بالاعتماد على كاشف الفلورة من أجل التحديد الكمي لـــ Ser, Gly، باستخدام العمود Agilent Zorbax Exclipe RP C18، و قياس الفلورة عندλEx= 340 nm)، (λEm= 450 nm. حصلنا على مجال قياس خطي µM- 250.5 من أجل Ser، 1 - 25 µM من أجل Gly ، و حساسية و دقة عاليتين، و يتبين ذلك من القيمة المنخفضة للانحراف المعياري النسبي المئوي RSD% الذي لم يتجاوز قيمته لأصغر تركيز محدد ( 3.25% بالنسبة لــ Ser و 3.07% بالنسبة لــ Gly) ، و بنتائج صحيحة و دقيقة من خلال المردود النسبي المئوي% (103.0-102.0) بالنسبة لــ Ser و %(95.8-94.0) بالنسبة لــ Gly. بلغ حد الكشف للسيرين nM36.82 و حد التحديد الكمي nM111.59 و حد الكشف للغلايسين 22.12 nM و حد التحديد الكمي nM67.02.