اشترك بالحزمة الذهبية واحصل على وصول غير محدود شمرا أكاديميا
تسجيل مستخدم جديداستخلاص و تنقية إنزيم galactosidase – β المستخلص من دماغ الماعز حديثة الولادة
Isolation and Purification of β-galactosidase From New Born Goat Brain
2239
1 42
0
(
0
)
تمت اﻹضافة من قبل
Shamra Editor
اسأل ChatGPT حول البحث
عزل إنزيم galactosidase-β من دماغ الماعز حديثة الولادة باستخدام تسع طرائق، و قد وجد بأن طريقة 2.0 مول/ لتر من خلات الصوديوم + 2.0 مول/ لترمن كلوريد الصوديوم PH 5 هـي الطريقـة المثلى لاستخلاص الإنزيم و بأعلى فعالية نوعية له مقارنة ببقية الطرائق الأخرى التي استخدمت للغـرض نفسه. و رسب هذا الإنزيم باتباع أربع طرائق و قد تبين أن استخدام الأسيتون البارد هي الطريقة الفُضلى. و كان عدد مرات التنقية نحو 46.135 مرة و بلغت الحصيلة نحو 14.77 % عند استخدام الترشيح الهلامي 200-S Sephacryl) الخطوة الثانية). و بلغ الوزن الجزيئي للإنزيم 437.187 كيلو دالتون.
β-galactosidase enzyme was isolated from the new born goat brain by nine methods, It was found that the sodium acetate 0.2 Mole/Liter +0.2Mole/Liter NaCl PH5 method have given the highest specific activity of crude enzyme in comparison with the other methods. Also, this enzyme was purified by using four methods, the second one (cold acetone) was the butter. As a result the purification fold was about 135.46 times and the yield about 77.14% by using Sephacryl S200 (second step). This enzyme is 187.437 KDa as a molecular weight.
مراجعة الذكاء الصنعي:
ملخص البحث
تناولت هذه الدراسة عزل وتنقية إنزيم β-جالاكتوسيداز من دماغ الماعز حديث الولادة باستخدام تسع طرق مختلفة. وُجد أن طريقة استخدام أسيتات الصوديوم بتركيز 0.2 مول/لتر مع كلوريد الصوديوم بتركيز 0.2 مول/لتر عند درجة حموضة 5 هي الأكثر فعالية في الحصول على نشاط نوعي أعلى للإنزيم الخام مقارنة بالطرق الأخرى. تم تنقية الإنزيم باستخدام أربع طرق، وكانت طريقة الأسيتون البارد هي الأفضل، حيث بلغت نسبة التنقية حوالي 135.46 مرة والعائد حوالي 77.14% باستخدام عمود Sephacryl S-200. تم تحديد الوزن الجزيئي للإنزيم بحوالي 187.437 كيلو دالتون.
قراءة نقدية
دراسة نقدية: تعتبر هذه الدراسة مهمة في مجال عزل وتنقية الإنزيمات، حيث تقدم معلومات قيمة حول الطرق المختلفة للحصول على إنزيم β-جالاكتوسيداز من مصادر غير تقليدية مثل دماغ الماعز حديث الولادة. ومع ذلك، يمكن توجيه بعض الانتقادات البناءة لهذه الدراسة. أولاً، لم يتم التطرق بشكل كافٍ إلى التطبيقات العملية للإنزيم المعزول في الصناعات المختلفة، مما يحد من فهم القارئ لأهمية هذه الدراسة في السياق العملي. ثانياً، كان من الممكن تقديم مقارنة أكثر تفصيلاً بين الطرق المختلفة المستخدمة في العزل والتنقية لتوضيح الفروق الدقيقة بينها. أخيراً، كان من الممكن تضمين المزيد من البيانات حول استقرار الإنزيم وفعاليته تحت ظروف مختلفة لتعزيز مصداقية النتائج.
أسئلة حول البحث
-
ما هي الطريقة الأكثر فعالية لعزل إنزيم β-جالاكتوسيداز من دماغ الماعز حديث الولادة؟
الطريقة الأكثر فعالية هي استخدام أسيتات الصوديوم بتركيز 0.2 مول/لتر مع كلوريد الصوديوم بتركيز 0.2 مول/لتر عند درجة حموضة 5.
-
ما هي نسبة التنقية والعائد للإنزيم باستخدام عمود Sephacryl S-200؟
نسبة التنقية حوالي 135.46 مرة والعائد حوالي 77.14%.
-
ما هو الوزن الجزيئي لإنزيم β-جالاكتوسيداز المعزول؟
الوزن الجزيئي للإنزيم هو حوالي 187.437 كيلو دالتون.
-
ما هي أفضل طريقة لتنقية الإنزيم من بين الطرق الأربع المستخدمة؟
أفضل طريقة لتنقية الإنزيم هي استخدام الأسيتون البارد.
المراجع المستخدمة
Abed, A. (2006). Isolation, Purification and Characterization of β-galactosidase From Local Chicken liver. Ph.D.thesis. University of Baghdad- Education College. Iraq
AL-Obaidy, H., 1975. Broad bean Lipoxygenase. M. Sc. Thesis, Food Sci. Dept. Agricultural college, Baghdad University
Al-Tamimi, S. (1996). The Enzymes Dissolving Proteins in Intact Grain, Abu Ghraib Variety, Infected with Sunna Insect and its Effect on Some Specific Characteristics. Ph.D. Thesis, College of Agriculture, Baghdad University
قيم البحث
اقرأ أيضاً
درست بعض خصائص إنزيم galactosidase-β المنقى و المستخلص من دمـاغ المـاعز حديثـة
الولادة. و توصلت الدراسة إلى أن الإنزيم من نوع بروتين سكري، و تشكل مكونات الجزء الكربوهيـدراتي
1.22 % و ذلك بالاعتماد على طريقة فينول- حمض الكبريتيك.
أما الدالة الحمضية
(pH) المثلى لفعالية الإنزيم فقد كانت 5.5 و يفقد الإنزيم فعاليته كليا عند الدالـة
الحمضية 5.8 ، و يظهر استقرارية عالية في المجال 4 - 6 من الدالة الحمضية.
و أظهرت النتائج أن درجة الحرارة المثلى لفعالية الإنزيم °55C عند الدالة الحمـضية المثلـى. أمـا
درجة الحرارة الملائمة لثبات الفعالية الإنزيمية فقد تراوحت بين °C 35 - 60 .
و قد أظهر الإنزيم قدرة على حلمأة (Hydrolysis) (سكر اللاكتوز Lactose) بتركيز 5 % إذ تراوح
مقدار الحلمهة بين 40 % بعد 60 دقيقة إلى 95 % بعد 270 دقيقة .
جمعت 40 عينة حليب من محافظة حمص لعزل البكتيريا المتبوغة و دراسة قدرتها
على إنتاج أنزيم β-galactosidase و تشخيص العزلة الأكثر كفاءة في إنتاج الأنزيم,
أظهرت النتائج وجود 25 عزلة منتجة لأنزيم β-galactosidase حيث قدرت فعالية
الβ-galactosidase باستخدام جهاز الطيفي الضوئي عند طول موجة420nm.
يعد إنزيم البتا - غالاكتوزيداز galactosidases (B-Ec 3.2.1.23) من أهم الإنزيما المستخدمة في الصناعات الغذائية وله العديد من التطبيقات الغذائية والتكنولوجية والبيئية الهامة في مجلات الحياة المختلفة . ويعتبر مثالاً هاماً لإنزيمات الحلمهة حيث يقوم البتا
- غالاكتوزيداز بحلمهة اللاكتوز غالاكتوزيداز إلى ىسكريات أحادية وهي الغلوكوز والغلاكتوز .
تضمنت الدراسة اختيار أفضل طريقة لاستخلاص الأنزيم من بين تـسع طرائـق، ركـز المحتـوى
البروتيني باستخدام الترسيب بالأسيتون البارد من بين خمس طرائق للتركيز (التنقية الجزئية). و أكملـت
مراحل التنقية باستخدام التبادل الأيوني الهلامي بعمـود (50-A Sephadex
– DEAE) ، و مـن ثـم
استخدام الترشيح الهلامي بعمود السيفاكريل 300-S إذ بلغت الفعالية النوعيـة 9.1162 وحـدة/ ملغـم
بروتين و الحصيلة الأنزيمية مقدارها 18.43 % و عدد مرات التنقية 61.8 مرة. ثم التأكد من نقاوة الأنزيم
بإجراء عملية الترحيل الكهربائي بغياب المواد الماسخة لبروتين إذ ظهرت حزمة بروتينية واحدة في هلام
متعدد اكريل أمايد.
أجريت هذه الدراسة على سلالة الماعز الألمانية البيضاء خلال عامي 2000 و 2001 في مركز
بحوث قسم الإنتاج الحيواني التابع لكلية الزراعة بجامعة الهومبولد في برلين بهدف اختبار جهاز
اللاكتوكوردر، الذي استخدم لتحديد منحنى جريان الحليب عند الأبقار وتبيان إمكا
نية استخدامه في تحديد
منحنى جريان الحليب عند الماعز، و كذلك دراسة المؤشرات الزمنية لهذا المنحنى.
سجل دخول لتتمكن من نشر تعليقات
التعليقات
جاري جلب التعليقات
سجل دخول لتتمكن من متابعة معايير البحث التي قمت باختيارها
